本生闡述：細胞凍存管的使用步驟及常見問題

　　凍存管一般用作實驗室細胞的低溫保藏。凍存管又名冷凍管，是常用的實驗耗材，多用于生物、醫(yī)藥、食品等行業(yè)。

　　凍存管介紹：

　　凍存管一般按容量劃分為0.5ml，1.0ml，1.5ml，1.8ml，2.0ml，4ml，5ml，7ml，10ml等。一般的凍存管不能進入液氮里，只有特殊材料處理的才可以放入。同時凍存管還有雙層的和無雙層的帶硅膠墊和沒有硅膠墊的等種種，還有無色和雜色及各種純色等不同。如果需要進入液氮保藏的就要選擇密封的耐低溫的專用凍存管，還要認清所購買的凍存管是否是無菌以及無DNA,RNA。

　　凍存管的使用步驟：

　　⑴ 從細菌純培養(yǎng)物中挑取新鮮培養(yǎng)物配成大約為3-4麥氏比濁度的菌懸液接種與菌種保存管中。

　?、?擰緊保存管，來回顛倒4-5次使細菌乳化，不能旋搖。

　?、?把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)

　　凍存管的常見問題：

　　1、問：Nunc凍存管可以滅菌嗎?

　　答：雖然凍存管使用聚yixi材料制造，但是我們不推薦客戶滅菌。

　　2、問：凍存管內旋蓋和外旋蓋有什么區(qū)別?

　　答：內旋凍存管為氣相液氮氣相中凍存樣品而設計，管口硅膠墊增強了凍存管的密封性;外旋凍存管為機械設備如冰箱中凍存樣品而設計，外旋蓋的螺紋蓋可以降低處理樣品時的污染幾率。

　　3、問：Nunc的凍存管可以浸入液氮(液相)中凍存樣品嗎?

　　答：Nunc的內旋凍存管可以在液氮中儲存，由于硅膠墊增強密封性。但超低溫度下，任何的密封材料都變得異常脆弱，理論上只要是機械密封就存在泄漏的危險，為了防止泄漏產(chǎn)品的危險，機械密封的凍存管必須密封在保護袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管，熱密封的聚yixi管專門為Nunc凍存管密封設計。將凍存管在液氮液相中凍存而沒有使用CryoFlex 密封管是十分危險的，凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進行熱密封。

　　4、問：當凍存管儲存在液氮液相中而沒有使用CryoFlex Tubing 時，如何正確的溶解復蘇細胞?

　　答：在整個操作過程中必須穿戴保護服，包括手套，臉罩等。凍存管從液氮液相取出后必須在液氮氣相中儲存24h，這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸，從而降低凍存管中的壓力。等在液氮氣相儲存24h后，將凍存管放入水浴槽，同時用毛巾覆蓋，等熔融復蘇結束后轉移凍存物。

　　5、問：使用CryoFlex 密封管時需要熱密封，這會不會影響細胞活性?

　　答：將樣品加入凍存管以前需要將凍存管置于4℃ 冰浴槽。

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