牛生長激素(GH)ELISA試劑盒，操作方法及步驟，對于牛生長激素(GH)ELISA試劑盒的操作步驟及其他注意事項(xiàng)，我司業(yè)務(wù)員整理如下：

使用目的

本試劑盒用于測定牛血清、血漿樣本中生長激素(GH)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

本 試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中牛生長激素(GH)水平。用純化的牛生長激素(GH)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入生長激 素(GH)，再與HRP標(biāo)記的生長激素(GH)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的生長激素(GH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中牛生長激素(GH)濃度。

牛生長激素(GH)ELISA試劑盒 操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測樣品孔中先加 樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。測定應(yīng)在加終止液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

牛生長激素（GH）ELISA試劑盒技術(shù)文獻(xiàn)

注意事項(xiàng)

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。次加樣時(shí)間控制在5 分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD 值)，請先用樣品稀釋液稀釋定倍數(shù)(n 倍)后再測定，計(jì)算時(shí)請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5. 封板膜只限次性使用，以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

8.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。